技術文章
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2023-228
細胞支原體污染的原因對于生物實驗器材細胞培養來說,如何預防細胞的支原體污染是每一個細胞培養者的都會考慮的問題,據統計,在細胞污染原因分析中有超過60%的細胞培養物污染都是由支原體所引起的。那么細胞支原體污染的原因有哪些呢?細胞支原體污染的原因主要包括:1.不良操作:如操作者未穿實驗服、未戴口罩、未熏蒸操作臺等,容易引起污染。支原體一般通過難以追蹤的各種來源進入細胞培養物。其中包括實驗室人員、血清、細胞培養基、水浴鍋、振蕩培養箱、生物反應器、細胞培養瓶等。人為污染是上述污染源中...
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2023-228
用肉眼或光學顯微鏡檢測支原體比較困難,所以支原體檢測一般會通過PCR的檢測、DNA染色、熒光標記、瓊脂平板接種等方法來實現。在支原體檢測之前,細胞應連續培養至少兩周,以便有時間讓低水平的污染物生長。對于測試,在取樣前至少兩三天內不應更換培養基。一、培養法在瓊脂平板/肉湯上培養被認為是檢測支原體的“金標準”。在這種方法中,將細胞培養物的上清液添加到液體或半固體培養基(含有支原體生長所必需的營養物質)中。受感染的細胞培養物會在液體肉湯和瓊脂平板上生長。瓊脂平板上很容易看到支原體菌...
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2023-228
細胞生物學研究、創新藥開發等領域經常會進行細胞體外培養,但是很多實驗員不知道該怎么選購細胞、細胞培養基、細胞培養試劑,本節小編帶你初步了解一下細胞系的選擇技巧、購買細胞培養基應考慮的因素。一、細胞培養的環境條件細胞的體外培養需要為細胞創造良好的細胞的存活和增殖環境,這樣的環境條件包括培養溫度、濕度和CO2水平、營養成分、酸堿度、滲透壓等。下表為大多數哺乳動物細胞的細胞培養的適宜條件。酸堿度7.0–7.4滲透壓280–320mmol/千克二氧化碳_5–10%溫度35–37°C二...
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2023-228
我們知道開始培養的細胞不能無限期地生長,因為受限區域內的細胞數量不斷增加,營養物質也會被消耗,從而導致有毒的代謝產物增加,另外根據實驗或生產需要,也要對細胞進行擴大培養。通過去除培養基并將細胞轉移到新鮮的生長培養基和基質中,細胞獲得了新鮮的營養并去除了有毒代謝物,從而可以長期維持培養。這個過程就屬于傳代培養,傳代培養的細胞密度會低于原始培養物中的細胞密度。當接種細胞后,細胞生長會經過滯后期、對數期,穩定期和凋亡期。在凋亡期,細胞會因缺乏營養或培養條件不當而死亡。貼壁細胞傳代培...
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2023-227
過濾器是生物安全柜的重要組成部分。了解過濾器的工作原理、維護級別以及過濾器需要多久更換一次,這些都是購買生物安全柜時需要考慮的因素。那么生物安全柜中的HEPA和ULPA過濾器有什么區別呢?生物安全柜中使用的過濾器,一般為高效微??諝?HEPA)過濾器和超低滲透(ULPA)過濾器,HEPA和ULPA過濾器有什么區別呢?HEPA和ULPA過濾器的結構及其工作原理從結構和化學角度來說,HEPA和ULPA過濾器非常相似。這些過濾器用于生物安全柜,其中氣流(由電機驅動)攜帶有害氣體和顆...
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